폴리소르베이트80 지방산 성분함량비 실무 대한민국약전 (KP) 시험법

폴리소르베이트80 대한민국약전 (KP) 지방산 성분함량비 시험법 실무 리뷰

 

USP랑 비교했을때 비슷하면서도 다르다. 표준품도 다르고..삼플루오르화붕소·메탄올시액 농도는 일반시험법에 명시되어있다.

삼플루오르화붕소·메탄올시액 삼플루오르화붕소(BF3 : 67.81)를 14 g/dL 함유한 메탄올용액이다. (편하게 시판용으로 구매하길)

삼플루오르화붕소·메탄올시액

 

 

대한민국약전(KP) 시험법

폴리소르베이트80 - 지방산 성분함량비

이 약 약 0.1 g을 정밀하게 달아 25 mL 삼각플라스크에 넣고 수산화나트륨의 메탄올용액(1 → 50) 2 mL에 녹이고 환류냉각기를 달고 30 분간 가열한다. 삼플루오르화붕소·메탄올시액 2.0 mL를 넣고 30 분간 가열한다. 냉각기 윗부분으로 n-헵탄 4 mL를 넣고 5 분간 가열한다. 식힌 다음 물과 염화나트륨을 2 : 1로 혼합하여 잔류하는 불용물이 없도록 여과한 염화나트륨포화용액 10 mL를 넣고 15 초간 플라스크를 흔들어 섞은 후 위의 맑은 액이 플라스크의 목 부분까지 올라오도록 염화나트륨포화용액을 충분히 넣는다. 위의 맑은 액 2 mL를 취하여 물 2 mL씩으로 3회 씻은 다음 무수황산나트륨으로 탈수여과하여 검액으로 한다. 따로 표 1과 같은 구성을 가지는 혼합물 0.50 g을 n-헵탄에 녹여 정확하게 50 mL로 한 액을 비교액 (1)로 한다. 비교액 (1)에 n-헵탄을 넣어 10 배 희석한 액을 비교액 (2)로 한다. 시험을 통해 지방산 구성을 알고 있는 지방산 메틸에스테르의 혼합물 0.50 g을 n-헵탄
에 녹여 정확하게 50 mL로 한 액을 비교액 (3)으로 한다 (지방산 메틸에스테르 혼합물을 구입하여 사용할 수 있다).

혼합물 정보

Nu Chek Prep Inc GLC Reference Standard

GLC-708

GLC-710

Nu Chek Prep Inc GLC Reference Standard

 

KP가 어떻게 보면 더 편할수도있겠다. 근데 0.50 g을 채취하라는데 한개에 0.1 g 인데? 5개 구매하라고? 빨리 수정해라!!! 제발... (공정서에 적혀 있으니 0.50 g 칭량)

검액 및 비교액 (3) 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 비교액 (3)으로 각 지방산 에스테르의 피크를 확인하고 검액에서 얻은 각 지방산에스테르의 피크면적 AC 및 검액에서 얻은 모든 지방산에스테르의 피크면적의 합 AT를 측정한다. 이 약의 각 지방산의 함량 (%)을 다음 식에 따라 계산할 때 그 값은 다음 표2와 같다. 

지방산 성분 함량 (%) = AC / AT × 100

 

조작조건
검출기 : 불꽃이온화검출기
칼 럼 : 안지름 약 0.32 mm, 길이 약 30 m인 기체크로마토그래프용 용융실리카관에 기체크로마토그래프용 폴리에틸렌글리콜(평균분자량 약 15,000)을 0.5 μm의 두께로 피복한 것 → DB-WAX 칼럼 임.
검체도입부온도 : 250 ℃ 부근의 일정온도
칼럼온도 : 주입할 때까지 80 ℃부근의 일정 온도를 유지하고 매분 10 ℃씩 220 ℃까지 승온하고 220 ℃로 40 분 이상 유지한다.
검출기온도 : 250 ℃ 부근의 일정온도
운반기체 : 헬륨
유 량 : 50 cm/ 초

 

시스템적합성
검출의 확인 : 비교액 (2) 1 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 미리스틴산메틸 피크의 S/N 비가 5 이상 임을 확인한다.
시스템의 성능 : 비교액 (1) 1 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 스테아르산메틸, 올레산메틸의 분리도는 1.8 이상이고 스테아르산메틸의 이론단수는 30000단 이상이다.

 

 

 

 

원료 제조처 지방산 성적서

 

시험 결과 크로마토그램

폴리소르베이트 80 지방산 크로마토그램

 

폴리소르베이트 80 지방산 크로마토그램